Endoplazmik Retikulum Stres Modeli Oluşturulan Fare Ovaryumlarında Katlanmamış Protein Yanıtının Araştırılması
Proje no. 22585 · Durum: Kapanmış (Yayın bekleniyor) · 2021
Özet
Endoplazmik retikulum (ER) stresi nörodejeneratif hastalıklar, metabolik hastalıklar, diyabet ve obezite, kanser ve çeşitli hastalıklar ile ilişkilendirilmiştir. ER stresini uyaran ve bu hastalıkların ortaya çıkmasını sağlayan birçok etken bulunmaktadır. Stres döneminde ER, hatalı protein katlanması sorunu ic¸in katlanmamıs¸ protein yanıtını (UPR) başlatır. UPR, üç trans-membran ER proteinin aktivasyonu gerçekleşir: PERK, IRE-1, ATF6. Aktif IRE1a ve eIF2-a apoptoz ve otofajiye aracılık ettiği bildirilmektedir. Tunikamisin (TM), proteinlerdeki asparagin gruplarının n-glikozilasyonunu inhibe eden bir antibiyotik olup gliokoprotein sentezini bozmaktadır. Deney hayvanlarına uygulanan TM ile oluşturulan ER stresi modellemesi bugüne kadar böbrek ve karaciğer gibi fonksiyonel organlar üzerinde oldukça etkili bir mekanizmaya sahiptir. Bunun yanında in vitro erken embriyonik döneme ilişkin araştırmalar mevcuttur. Farklı UPR yanıtlarının ve ER stres mekanizmalarının ovaryan döngüde geç evre foliküllerinde, oosit maturasyonunda eksprese edildiği, çeşitli hastalıklarda ovaryumda ER stres mekanizmalarına ilişkin bazı araştırmalar bulunmaktadır. Ovaryum folikülogenez fizyolojik sürecinde çeşitli etkileri olduğu bildirilmekle beraber TM’ye bağlı UPR yanıtları ER stres yolakları yeteri kadar aydınlatılamamıştır.<br /> Çalışmamızda, TM uygulaması ile in vivo ER stres mekanizması aktifleştirilerek katlanmamış protein yanıtının ovaryum üzerindeki etkisi akut ER stres modelinde incelenmesi amaçlanmıştır. ER stres aktivatörü olan Tunikamisin ile deneysel olarak akut ER stres modeli oluşturulan yetişkin farelerin ovaryumlarında folikülogenez temelinde histolojik değişiklikler histomorfometrik analizler ile ortaya konması ve ayrıca ER stresine bağlı olarak katlanmamıs¸ protein yanıtına (UPR) bağlı yolaklardan GRP78, EIF2a ve IRE1 yolağı üzerinden Caspase3 ve Beclin immünohistokimyasal boyamaları ile ışık mikroskobunda protein analizleri ortaya konarak ovaryumda ER stresi apoptoz ve otofaji mekanizmaları yönünden araştırılması hedeflenmektedir.<br /> <br />