Geleneksel Yoğurtlardan İzole Edilen Streptococcus thermophilus Suşlarının Hyaluronik Asit Üretim Potansiyelinin ve İlgili Genlerin Tespit Edilmesi
Proje no. 21789 · Durum: Kapanmış (Yayın bekleniyor) · 2020
Özet
Bu çalışma kapsamında, Türkiye'nin farklı bölgelerinde geleneksel yöntemlerle üretilen yoğurtlardan izole edilen laktik asit bakterileri (LAB) ve referans olarak kullanılan Streptococcus thermophilus RSKK 04082 suşunun hyaluronik asit (HA) üretim kapasiteleri araştırılmıştır. İzolatlar arasından referans suşa benzeyen bir LAB tespit edilmiş ve LAB’nin genotipik tanımlaması yapılmış ve Enterococcus faecium (D4-16) olduğu tespit edilmiştir. S. thermophilus RSKK 04082 ve E. faecium (D4-16)’un 38 saatlik periyotta canlı hücre sayımları yapılmış ve sırasıyla 10,11 log kob/mL ve 9,75 log kob/mL olarak 18. saatte en yüksek canlı hücre sayısına ulaştığı tespit edilmiştir. Primer metabolit olduğu bilinen HA’nın konsantrasyonunu belirlemek için karbazol metodu kullanılmış ve glukuronik asit standardı kullanılarak çizilen standart eğri dikkate alınarak HA miktarları belirlenmiştir. S. thermophilus RSKK 04082 ve E. faecium (D4-16)’un en yüksek HA konsantrasyona 16. saatte ulaştığı ve sırasıyla 66,92 mg/L ve 64,50 mg/L olduğu belirlenmiştir. Fourier dönüşümlü kızılötesi spektrofotometresine (FTIR) göre her iki mikroorganizma tarafından üretilen ekzopolisakkaritlerin HA olduğu belirlenmiştir. Ayrıca HA üretiminden sorumlu genlerin belirlenmesi amacıyla primerler tasarlanmış ve hem S. thermophilus hemde E. faecium (D4-16) genomik DNA ile PCR yapılmıştır. Yapılan PCR sonunda her iki suş ile hasA gen bölgesi olduğu düşünülen bir bölge çoğaltılmıştır.