Biyolojik Mücadele Etmeni Olarak Bacillus İzolatlarının Ekonomik Bir Prosesle Üretim Optimizasyonu
Proje no. 20159 · Durum: Kapanmış · 2019
Özet
Günümüzde kullanılmakta olan kimyasal ürünler çevre ve insan sağlığı açısından yüksek risk taşımaktadır. Pestisitlerin aşırı kullanımı; uzun süre kalıntı bırakması, geniş spektrumda organizmalara toksisite göstermesi ciddi çevresel problemleri beraberinde getirmektedir. Biyolojik mücadele ise, bitki patojenlerine karşı spesifik mikroorganizmaların kullanıldığı çevre dostu, bitki korunmasında standart kimyasal yöntemlerin sebep olduğu problemleri ortadan kaldırmaya yönelik çevreci bir yaklaşımdır. Bu sebeple çalışmamızda seçilecek yüksek antifungal etki gösteren yerli izolatlar, ileride geliştirilebilecek biyolojik mücadele biyopreparatlarının temelini oluşturacaktır.<br /> Bu projede, EÜ Biyomühendislik Bölümü <em>Bacillus</em> Kültür Koleksiyonunda yer alan çeşitli su, çamur ve toprak örneklerinden asetatlı seçilim yöntemiyle izole edilmiş potansiyel <em>Bacillus thuringiensis</em> izolatları ile diğer bazı <em>Bacillus spp.</em> izolatları olmak üzere yaklaşık 1000 adet izolatın bitkisel üretimde kayıplara neden olan <em>Botrytis cinerea, Fusarium solani, Rhizoctonia solani </em>gibi fitopatojenik funguslara karşı antifungal etkisi in vitro petri denemeleri ile incelenecek ve en yüksek antifungal etkiyi gösteren izolatlar belirlenecektir. Bu izolatların hücresiz kültür süpernatantları etil asetat ile ekstrakte edildikten sonra liyofilizasyon yöntemi ile konsantre edilecek ve agar kuyucuk difüzyon metodu kullanılarak antifungal etkileri belirlenecektir. Antagonistik etkileri belirlenen <em>Bacillus</em> izolatlarının kitinaz, kitosanaz, glukanaz ve proteaz gibi litik enzim aktivitelerinin belirlenmesinin yanı sıra surfaktin ve iturin A gibi antibiyotiklerin kromatografik analizlerle tayini de hizmet alımı şeklinde gerçekleştirilecektir.<br /> Daha sonra potansiyel <em>Bacillus thuringiensis</em> izolatları için kristal proteinlerin (delta endotoksin) üretimi gerçekleştirilerek kristal proteinler çözündürüldükten sonra bu proteinlerin antifungal etkisi olup olmadığı da agar kuyucuk difüzyon yöntemi ile incelenecektir. İncelenen tüm mekanizmalar göz önünde bulundurularak en yüksek antifungal etkiyi gösteren izolatlar belirlenerek moleküler düzeyde türleri belirlenecektir.