Pankreas Duktal Adenokarsinomu Hücrelerinde Kalsiyum ve Gemsitabinin Kombinasyonunun Antikanser Aktivitesinin Değerlendirilmesi
Proje no. 24166 · Durum: Kapanmış · 2022
Özet
<p>Pankreas kanseri, ölüm oranı neredeyse insidans oranına eşit olan dünyadaki en fatal malignitelerden biridir. Pankreas malignitelerinin yaklaşık %90'ını oluşturan pankreas duktal adenokarsinomu (PDAK), batı dünyasında kansere bağlı ölümlerin dördüncü önde gelen nedenidir. Tanı koyulduktan sonra 5 yıllık hayatta kalım oranı %1 ile %14 arasında değişkenlik gösterir. Türkiye’de pankreas kanseri; 50 yaş ve üzeri kadın ve erkeklerde en sık görülen kanser türleri içerisinde 6. sıradadır. Cerrahi rezeksiyon hala küratif tedaviyi sağlayabilecek tek yaklaşımdır ancak sadece hastaların %10-20’si için uygundur.</p><p> Cerrahi rezeksiyon ardından adjuvan kemoterapide bir numaralı terapötik çözüm olarak kullanılan Gemsitabin (2',2'-diflorodeoksisitidin / dFdC), hücrede DNA sentezini inhibe ederek farmakolojik etki gösteren bir nükleozid analoğudur.</p><p> E-kadherinler, Ca++ bağımlı hücre-hücre bağlantı proteinleridir. E-kadherin ekspresyonundaki azalmanın özellikle solid tümörlerin ilerlemesine katkıda bulunduğu bilinmektedir. Kalsiyumun, e-kaderin ekspresyonunu pozitif yönde değiştirerek tümör hücrelerinin giderek daha kötü huylu bir fenotipe doğru evrilmesini engelleyebileceği meme kanseri üzerine yapılan bir çalışmada kanıtlanmıştır.</p><p> Yapılması önerilen bu araştırma projesinde, kematerapötiklerin ve mevcut tedavilerin yetersizliği gibi problemler göz önünde bulundurularak, pankreas kanserinin kötü progresyonunu en aza indirmek amaçlanmıştır.</p><p> İlk olarak pankreas kanser modeli olarak MIA PaCa-2 (pankreas duktal adenokarsinomu hücre hattı) hücreleri kullanacaktır. Araştırmada, yalnızca kalsiyum ve yalnızca Gemsitabinin ayrı ayrı ve kombinasyon halinde etkilerinin incelenebilmesi için 4 grup oluşturulacak ve yapılması planlanan tüm diğer analizler bu 4 grup üzerinden gerçekleştirilecektir. Deney gruplarındaki hücrelerin sitotoksisitenin değerlendirilebilmesi için WST-8 testi yapılacaktır, apoptozun değerlendirilebilmesi için FITC Annexin V kiti kullanılacaktır. Hücrelerdeki E-kaderin ekspresyonunun analizi için öncelikle RNA izolasyonu, ardından cDNA sentezi yapılarak, gerçek zamanlı polimeraz zincir reaksiyonu (RT-PCR) ile analiz yapılacaktır. Son olarak yapılacak olan istatistiksel analizlerle de toplanan sonuçlar değerlendirilecektir.</p><p> Yapılacak olan deneyler sonucunda kalsiyum ve Gemsitabinin kombine olarak verildiği hücre grubunda apoptotik değerlerde ve e-kadherin ekspresyonunda diğer deney gruplarına kıyasla ayırt edilebilir derecede yüksek bir fark olması beklenmektedir. Ek olarak hücre proliferasyon değerlerinin diğer deney gruplarına oranla daha düşük olması da hipotezimizi destekleyecek olan bir diğer sonuç olacaktır. </p>