Galleria mellonella larvalarının, Salmonella enterica ile enfeksiyonu sonrası gerçekleşen immün yanıt sürecinin programlı hücre ölümü mekanizmaları ile ilişkili olarak araştırılması
Proje no. 31910 · Durum: Kapanmış (Yayın bekleniyor) · 2023
Özet
<p>Büyük balmumu güvesi olarak bilinen <em>Galleria mellonella</em> larvaları 37 °C’ de yaşayabildiklerinden enfeksiyon çalışmaları için oldukça ideal model organizmalardır. <em>Salmonella enterica</em>, insanlarda ve çeşitli hayvanlarda önemli bir enterik patojendir. Otofaji, apoptoz ve piroptoz mekanizmaları, immün sistemin bir parçası olarak, bu patojenlerin yıkımında oldukça etkili bir rol oynamakla birlikte bazı durumlarda, patojenler bu mekanizmaları kullanarak konakçı bağışıklığını ele geçirir ve ölüme sebep olur. Bu çalışmada, <em>Galleria mellonella</em> larvalarında, <em>Salmonella enterica</em>’ nın ağız içi inokulasyon yoluyla gerçekleştirilecek bulaşı sonrasında, hemolenfte meydana gelen hücresel ve protein profillerindeki değişimler ile enfeksiyon etkeni hedefi olan orta bağırsak dokusundaki, metabolik etkilerin ve bakterinin hücre içi patojenik etki sürecinde otofaji, apoptoz ve piroptoz mekanizmalarının rollerinin araştırılması amaçlanmıştır. Elde edeceğimiz sonuçlar, literatürdeki bilgi eksikliğini giderecek, enfeksiyon sonrasında gerçekleşen fizyolojik değişimlerinin, otofaji, apoptoz ve piroptozun enfeksiyonun hangi aşamasında, hangi etkiler sergilediğinin anlaşılmasında önemli bilgiler elde etmemizi sağlayacak ve insan dahil diğer organizmalarda gerçekleşen süreçlerle karşılaştırma yapmamızı mümkün kılacaktır. Çalışmamızda, 7. larval evrenin 2. gününe geçen böcekler 2 gruba ayrılacaktır. Birinci grup normal şekilde beslenmeye devam edecek; ikinci grup ise <em>Salmonella enterica</em> ile enfekte edilecektir. Her iki grup beslenmelerinin 3., 6., 12., 18. ve 24. saatlerinde disekte edilecektir. Hemolenf hücreleri, morfolojik olarak analiz edilecek, protein profilleri ortaya konacaktır. Orta bağırsak dokularında morfolojik ve biyokimyasal analizler ile birlikte, enzim analizleri yapılacak, Atg8 proteini Western blot yöntemi ile belirlenecek, DNA kırıkları Agaroz jel elektroforezi ile tayin edilecektir. Elde edilecek sonuçlar istatistiksel olarak değerlendirilerek kontrol ve uygulama grubu arasında anlamlı bir farklılık olup olmadığı belirlenecektir. Çalışmanın 24 aylık süreç içerisinde tamamlanması hedeflenmektedir.</p>