KANDA HİPOKSİ İLE İNDÜKLENEBİLİR FAKTÖR-1 ALFA DÜZEYİNİN ÖLÇÜLMESİ İÇİN ELEKTROKİMYASAL BİYOSENSÖR SİSTEMİ GELİŞTİRİLMESİ
Proje no. 182 · Durum: Kapanmış · 2018
Özet
Hipoksi, beden dokularında oksijen oranının azalması sonucunda oluşan toksik bir durumdur. Bu durumda vücuttaki bir çok metabolik faliyet değişmekte ve hipoksi durumunu gösterebilen belirteçlerin konsantrasyonları yükselebilmektedir. Yapılan çalışmalarda, Hipoksi ile indüklenebilir faktör- 1alfa (HIF- 1?), hipoksiye adaptasyon cevabının gelişiminde anahtar rol oynayan bir transkripsiyon faktör olduğu görülmüştür. HIF-1alfa oksijen homeostazının esas düzenleyicisi olup; anjiogenez, eritropoez, metabolizma, proliferasyon, migrasyon ve hücre yaşamını düzenlemek üzere hipoksiye adaptif hücresel cevaptan sorumludur. Bu çalışmada; doku oksijenasyon seviyeleri düşük, Diabetes Mellitus tanısına sahip ve buna bağlı sık görülen bir komplikasyon olan diyabetik ayak yarası olup Diyabetik Ayak Konseyi’ ne katılmış ve konsey kararında ampütasyon planlanmış hastalarda doku oksijenlenmesini gösteren bir parametre olan serum hipoksi ile indüklenebilir faktör- 1alfa düzeyleri doku oksijenasyonunu gösterebilecek yeni geliştirilecek elektrokimyasal impedans spektroskopisi (EIS) temelli biyosensör sistemi ile incelenmiştir ve böylece HIF-1? ölçümü için yeni bir yöntem geliştirilmiştir. Bu yöntemde biyotanıma reseptörü olarak HIF-1alfa antibadileri kullanılmıştır. Bu immobilizasyon için elektrot önce albümin, sonrasında PAMAM ile modifiye edilmiştir. Kronoimpedans verilerine göre, EIS için toplam analiz süresi 15 dakika olarak seçildi. Yeni biyosensör 5 saatten fazla süre gerektiren ELISA yöntemi ile karşılaştırılmıştır. Kalibrasyon eğrisi elektrotun elektron transfer direnci ohm ve HIF1 biyosensörünün 50 pg/mL ila 1000 pg/mL arasında kalibrasyon eğrisi elde edilmiştir. R2 değeri ise 0,9964 olarak bulunmuştur. Biyosensörün LOD ve LOQ'u sırasıyla 14,45 pg/mL, 43,8 pg/mL olarak hesaplandı.