Sitokinle Uyarılan Beta Hücre Harabiyetinde sCD83 Molekülünün anti apopitotik Etkisinin Araştırılması
Proje no. 23484 · Durum: Kapanmış (Yayın bekleniyor) · 2022
Özet
Tip 1 Diabetes Mellitus (T1DM), çocukluk çağında görülen, pankreastaki insülin üretiminden sorumlu beta hücrelerinin otoimmün harabiyetiyle karakterize, kronik, kişiyi ekzojen insüline bağımlı hale getiren bir hastalıktır. Hayat boyu insülin kullanımına muhtaç olmak tedaviye uyumu güçleştiriken T1DM için nedene yönelik , kalıcı yeni tedavi yaklaşımlarını da araştırma konusu haline getirmiştir. Literatürde, insan serumunda bulunan sCD83 molekülünün immunmodülatör etkisi çeşitli otoimmun hastalıklarda gösterilmiştir. T1DM hastalarında yapılan bir çalışmada CD83 molekül düzeyleri düşük olarak bulunmuştur. Bugüne kadar CD83 molekülünün beta hücre harabiyeti üzerine koruyucu etkisini araştıran bir çalışma yayımlanmamıştır. Bu projede sCD83’ ün immunmodülatör etkisinin beta hücrelerinde sitokin aracılı hücre harabiyeti üzerine etkisini hücre kültüründe incelemeyi amaçladık. <br /> Projenin ilk aşamasında sitokin aracılı beta hücre harabiyeti yapılması planlanmıştır. Bu amaçla insandaki PANC1 (Ma et al., 2020),hücreleri kullanılacak olup, Interleukin-1 beta(IL-1 beta;50 ng/ml), Interferon-gama(IFN-gama;25 ng/ml) ve Tumor necros factor-alfa(TNF-alfa;25 ng/ml) karışımı ile hasar gerçekleştirilecektir. (Billert et al., 2020). 6 saatlik inkubasyon sonrasında hücre canlılığı belirlenecektir.(Güleş, Eren and Kelimeler, 2008). İkinci aşamada, sCD83 için sitotoksik doz belirleme çalışması için kültür ortamına farklı konsantrasyonlarda sCD83 eklenecektir. IC50 dozu belirlendikten sonra kültür ortamına uygun dozda CD83 eklendikten sonra sitokin ile hücre harabiyeti uygulaması yapılacaktır. Bu uygulama sonrasında hücre canlılığı analizleri yapılarak sonuçlar sCD83 eklenmemiş olan kültürdeki sonuçlar ile karşılaştırılacaktır. Hücrelerde anti apopitotik aktivite hem sitokinle uyarılan hem de sCD83 eklenmiş hücre kültürlerinde değerlendirilecektir. Bu projede hücre harabiyetinde ve CD83 uygulanması sonrasında hücrelerde Caspaz 3 ve APAF-1 düzeyleri belirlenecektir. <br /> Çalışmamız 12 ay olarak planlanmıştır. sCD83'ün koruyucu etkisinin gösterilmesi halinde bu çalışma hem yeni çalışmalar için kaynak oluşturacak hem de tip 1 DM tedavisi için yeni bir umut olacaktır.