IN-VIVO YÖNTEMLERE ALTERNATİF OLARAK IN-VITRO YÖNTEMLE İNAKTİF NEWCASTLE HASTALIĞI AŞILARINDA ETKİNLİK TAYİNİ
Proje no. 246 · Durum: Kapanmış · 2016
Özet
Bu tez çalışmasında, inaktif Newcastle hastalığı aşılarının etkinliğinin belirlenmesinde, hayvan kullanımını azaltan ya da ortadan kaldıran in-vitro ELISA metodunun uygulanabilirliği araştırılmıştır. Bu amaçla, Newcastle hastalığına karşı kanatlı hayvanlarda kullanılan tek ya da çok komponentli 9 inaktif Newcastle hastalığı aşısı ile yalancı reaksiyonları değerlendirmek için Newcastle hastalığı virusu içermeyen 2 aşı kullanıldı. Aşıların etkinlik düzeyleri in-vivo ve in-vitro yöntemlerle değerlendirildi. In-vivo olarak “Spesific Pathogen Free” (SPF) civcivlerin aşılanması sonrası oluşan antikor yanıtın serolojik olarak değerlendirildiği hemaglütinasyon inhibisyon testi ve SPF civcivlerde koruma düzeylerinin belirlendiği çalenç/eprüvasyon çalışmaları gerçekleştirildi. In-vitro olarak ise İnaktif Newcastle hastalığı aşıları için geliştirilmiş olan ve aşıda bulunan hemaglütinin ve nöraminidaz antijenlerini saptamaya yönelik sandviç ELISA testi kullanıldı. ELISA testinden elde edilen optik dansite sonuçları kullanılarak Combistats İstatistiksel Analiz Yazılım Programı ile paralel doğru analiz metoduyla aşıların relatif potens değerleri hesaplandı. Hemaglütinasyon inhibisyon test sonuçları 23,3 ile 26,1 aralığında, immunizasyon-çalenç sonuçları 56 ile 136 PD50 aralığında ve ELISA testi ile relatif potens değerleri 6,02 ile 98,23 antijen ünitesi aralığında bulundu. ELISA testi ile immunizasyon-çalenç testi arasında (r2=0,93) ve hemaglütinasyon inhibisyon testi ile immunizasyon-çalenç testi arasında (r2=0,95) anlamlı korelasyon saptandı. ELISA testinin duyarlılığı %89, özgüllüğü ise %100 olarak hesaplandı ve tekrarlanabilirlik, tekrar üretilebilirlik değerleri açısından kabul edilebilir sınırlar içinde seyrettiği görüldü. Bu sonuçlara göre, laboratuvar şartlarında ELISA metodunun uygulanabilirliği, standart prosedüre olan uyumu ve aynı örnekler üzerinde benzer sonuçlar verebilme yeteneği gösterilmiş oldu.