Endoplazmik Retikulum Stres İlişkili Bazı Moleküllerin Sisplatin ile Kombinasyonunun Sisplatine Dirençli Akciğer Kanserine Etkilerinin İncelenmesi
Proje no. 32145 · Durum: Kapanmış (Yayın bekleniyor) · 2024
Özet
<p> Endoplazmik retikulum (ER), proteinlerin düzgün katlanması ile işlenmesi, kalsiyum depolanması ve lipid biyosentezi üzerinde önemli role sahip olan multi-fonksiyonel bir organeldir. ER işlevini bozabilecek ER stres koşulları proteotoksisiteye ve katlanmamış protein seviyelerinin artışına neden olabilmektedir. Katlanmamış protein yanıtı (UPR), protein homeostazını düzenlemek için kullanılan adaptif bir yanıttır. UPR adaptif yanıtının temel görevleri arasında ER stresi azaltarak ER homeostazının düzenlenmesi, ER homeostazının sağlanmasının ardından negatif feedback mekanizması ile UPR’nin bloke edilmesi ve apoptozun düzenlenmesi yer almaktadır. Kullanılan kemoterapötik ilaca karşı direnç gelişimi kanser tedavisinde önemli engeller arasındadır. Örneğin akciğer kanseri tedavisinin rutin olarak kullanılan sisplatinin tek başına kullanımı, sisplatine karşı direnç gelişimi nedeniyle sınırlıdır. Kronik ER stresi koşulları altında hayatta kalmaya uyum sağlayan hücreler ER stresine ve kemoterapiye karşı eş zamanlı direnç kazanmaktadırlar. Bu kapsamda projemiz, kemoterapötik ajan olan sisplatine karşı direnç kazandırılacak küçük hücreli olmayan akciğer kanseri alt tipi adenokarsinom hücre hattı A549/CDDPr’de, sisplatin ile kombinasyonu sonucunda sinerjik etki gösterebilecek ve sisplatin direnç mekanizmasını geri çevirebilecek bazı ER-stresi ile ilişkili UPR ve ERAD yolaklarına etki eden moleküller olan 4μ8c, GSK2606414, Eeyarestatin 1 ve Bortezomib’in olası etkilerini inceleyecektir. Çalışmamızda, sisplatin ile ER-stres ilişkili molekülleri önce tek başına ardından kombinasyonları halinde A549 ve A549/CDDPr hücrelerinde oluşturdukları sitotoksisiteleri MTT testiyle belirlenip sırasıyla IC50 değerleri, hücre canlılığı hesaplanacaktır. A549/CDDPr hücrelerinde sisplatin direncini geriye çevirerek sinerjik etki gösteren molekül kombinasyonları için Western-Blot yöntemiyle ER-stresi ile ilişkili proteinler incelenecektir. Projemiz A549/CDDPr hücrelerinde yukarıda belirtilen molekül kombinasyonlarının ER stresi ile ilişkisi ve hücrelerin <em>Sisplatin direncine duyarlı hale getirilmesi açısından yorumlanması</em> ilk kez bu çalışma kapsamında rapor edilecektir. </p>