Bakteriyel Selülozun Aşı Adjuvanı Olarak Kullanım Potansiyelinin Değerlendirilmesi
Proje no. 20783 · Durum: Kapanmış · 2019
Özet
Günümüzde aşılar önemli aşamalar kaydetmiş olsa da, adjuvan ihtiyacı söz konusu olduğunda yeni aday moleküllere ihtiyaç duyulmaktadır. Alüminyum adjuvanlarının istenmeyen birçok yan etkisi olmasına rağmen halen daha yerini alabilecek bir alternatif bulunamamıştır. Bu tez çalışmasının amacı, mikrobiyal yöntemle sentezlenen bakteriyel selülozun (BS) alternatif aşı aduvanı olarak potansiyelinin değerlendirilmesidir. Bu kapsamda mikrobiyal yöntemle Gluconacetobacter xylinus suşundan sentezlenen BS’nin fiziksel ve kimyasal yöntemlerle partikül forma dönüştürülmesi optimize edilmiş, elde edilen fibril mikropartiküllerin Zetasizer ve Taramalı Elektron Mikroskobu (SEM) ile karakterizasyonu yapılmıştır. Ardından sığır serum albümin ile kojuge hale getirilen mikropartiküllerin makrofaja farklılaştırılmış U937 hücreleri üzerindeki sitokin salgılama [(tümör nekroz faktörü a (TNF-a) ve interlökin 6 (IL-6)] ve hücresel alım çalışmaları gerçekleştirilmiştir. Çalışmada model antijen olarak bovin serum albümin (BSA), pozitif kontrol olarak ise aliminyum tuzu kullanılmıştır. Salgılanan TNF-a ve IL-6 seviyeleri ELISA (Enzim bağlı immunosorbent assay) kitleri ile ölçülmüş, hücresel alım ise konfokal mikroskop ile incelenmiştir. BS partikülü elde etmede asit hidroliz yöntemi iyi sonuçlar vermiş ve 1-5 µm boyutlarında fibril mikropartiküller elde edilmiştir. Makrofaja farklılaştırılmış U937 hücrelerine verilen 500µg/ml BSA-BS konjugatı ile en yüksek TNF-a sitokin seviyesi (113 ng/ml) elde edilmiş ve pozitif kontrol grubunun sitokin seviyesi (49,833 ng/ml) ile kıyaslandığında istatistiksel olarak anlamlı olduğu ve BS mikropartiküllerinin hücresel alımı gösterilmiştir. IL-6 sitokin seviyesinde ise alum grupları ile aralarında istatistiksel olarak anlamlı bir fark saptanmamıştır. Sonuç olarak BS mikropartiküllerin istenen şekilde kısıtlı IL-6 üretimi ile TNF-a sitokin seviyesini arttırdığı ve aşı adjuvanı olarak kullanım potansiyeli olduğu belirlenmiştir.