Bütil Hidroksitolüen Konsantrasyonunun Saanen Teke Sperminin Donmasına Etkisi
Proje no. 23299 · Durum: Kapanmış (Yayın bekleniyor) · 2021
Özet
Teke sperması kriyoprezervasyonundan önce santrifüj ile yıkanmış ve yıkanmamış sperm etkisi değerlendirilecektir. Aynı zamanda başarılı bir teke spermi kriyoprezervasyonunu arttırmada optimal bir konsantrasyon bulmak için sulandırıcıda antioksidan olarak farklı konsantrasyonlarda (0.6 mM, 2 mM ve 5 mM) bütil hidroksitolüen (BHT) ilavesi üzerinde çalışılacaktır.<br /> Bu nedenle, yaklaşık 1-2 yaş arasındaki 2 tekeden taze ejakülatlar toplanacaktır, hemen eşit miktarlarda karıştırılacaktır ve 2 parçaya bölünecektir. Bir kısım, Tris-sitrik asit-glukoz (TCG) solüsyonunda (1:5) seyreltilecektir ve iki defa 600 x g'de 10 dakika boyunca santrifüj edilerek yıkanırken, diğer kısım yıkanmadan tutulacaktır.<br /> Daha sonra yıkanmış ve yıkanmamış sperm, işlemlere göre BHT ile desteklenmiş veya eklenmemiş %5 gliserol ve %15 toz yumurta sarısı içeren farklı TCG bazlı ortamlardan birinde yeniden süspanse edilecektir: 1) yıkanmış sperm; 2) yıkanmış sperm + 0.6 mM BHT; 3) yıkanmış sperm + 2 mM BHT; 4) yıkanmış sperm + 5 mM BHT; 5) yıkanmamış sperm ve 6) yıkanmamış sperm + 5mM BHT.<br /> Daha sonra sperm örnekleri 0.25 mL'lik payetlere paketlenmeden ve nitrojen sıvı buharında dondurulmadan önce 5ºC'de 4 saat buzdolabında saklanacaktır. Çözüldükten sonra plazma ve akrozom membran bütünlüğü ve mitokondriyal aktivite akış sitometrisi ile, sperm motilitesi ve morfometrisi ise Bilgisayar Destekli Sperma Analizi (CASA) ile belirlenecektir.<br /> Beklenen sonuçlarımız, Saanen teke spermasında BHT eklenmesinin, sulandırıcılarda çözülmüş yıkanmış ve yıkanmamış spermlerin kalite parametrelerinin çoğunu iyileştirip iyileştirmediği saptanacaktır.<br />