Ostolün Sıçan Ventilatörle İndüklenen Akciğer Hasarı (VILI) Modelindeki Potansiyel Terapötik Etkileri ve TRPV4 Kanalı ile Olası İlişkisinin İncelenmesi

Proje no. 32108 · Durum: Kapanmış (Yayın bekleniyor) · 2023

Özet

Akciğer inflamasyonunun geliştiği hastalıklarda (COVID-19 gibi) solunuma destek amaçlı mekanik ventilasyon gerekmektedir. Akciğer heterojenitesi, ventilatöre uyum ve uygulamalardaki sorunlar ventilatör ile indüklenmiş akciğer hasarı (VILI)’ye neden olmakta, VILI de inflamasyonu ve ödemi artırmaktadır. VILI ilişkili patolojilerin önlenebilmesi ve tedavi stratejilerinin geliştirilmesi mekanik ventilasyonun yararı açısından son derece önemlidir. Akut respiratuvar distres sendromu (ARDS) VILI aracılı gelişen en önemli mortalite sebeplerindendir. VILI aracılı mekanik hasarın önemli bileşeni Transient reseptör potansiyel vanilloid 4 (TRPV4)’tür. Başta akciğer, böbrek, deri ve kemikte olmak üzere fizyolojik/patolojik fonksiyonlara sahip, yaygın eksprese edilen, seçici olmayan bir katyon kanalıdır. Yüksek kalsiyum geçirgenliğine sahiptir ve mekanosensör özelliktedir. TRPV4 aktivasyonuyla ilişkili inflamatuvar yanıtlar; proinflamatuvar sitokin, kemokin ve komplementlerin salıverilmesi, alveollerde endotelyal-epitelyal bariyerin bozulması ve alveollere nötrofil infiltrasyonu gibi mekanizmalar üzerinden başlatılır. TRPV4 aracılı kalsiyum girişi, orta iletken kalsiyum ile aktive potasyum kanalı (KCa 3.1.)’nı aktive eder. TRPV4 ile KCa 3.1. aktive olduğunda hücre içine klorür ve su transportu gerçekleşir, proinflamatuvar sitokin üretimi ve alveoller sıvı birikimi sonucunda da pulmoner ödem ve akciğer inflamasyonu ile solunum sıkıntısı görülür. Böylece KCa 3.1., TRPV4’ün akciğer üzerindeki patolojik etkisine tamamlayıcı etkiler gösterir. Ostol pek çok farmakolojik etkiye sahip doğal bir kumarindir. Ostolün antiinflamatuvar; voltaj bağımlı ve reseptörle aktive kalsiyum kanal inhibisyonu etkileri bildirilmektedir. 2023 yılında yapılan bir çalışmada, deride ve kıl foliküllerinde TRPV3 kanal inhibisyonu yaparak saç dökülmesini engelleyici ve antiprüritik etkileri gösterilmiştir. Bu nedenle ostol, VILI ilişkili hasarda koruyucu/tedavi edici etkilere sahip olabilir. Literatürde ostolün TRPV4 kanalı ve KCa 3.1. ile ilişkisine dair bir çalışma bulunmamaktadır. Çalışmamızın hipotezi, ostol bu kanalları bloke ederek/ekspresyonlarını değiştirerek TRPV4/KCa 3.1. aracılı gelişen VILI hasarını önleyebilir/iyileştirebilir ve hastaları mekanik ventilasyonun yaratacağı komplikasyonlara karşı koruyabilir şeklindedir. Çalışmamızda VILI modeli oluşturularak, ostolün antiinflamatuvar etkileri ve TRPV4/ KCa 3.1. kanalları ile ilişkisi araştırılacaktır. TRPV4 ile ostol arasındaki ilişki aydınlatılabilirse, TRPV4 ilişkili hastalıkların tedavisi için ostolün klinikte kullanılma potansiyeli söz konusu olacaktır. Sprague dawley sıçanlarda mekanik ventilatör ile VILI modeli oluşturulacaktır. VILI'den 30 dk önce ve VILI'den hemen sonra ostol uygulaması ile ostolün koruyucu ve tedavi edici etkileri araştırılacaktır.1. Sıçanda in vivo yapılacak deneyler1.1. Hayvanların hazırlanması1.2. Ventilatör ile indüklenmiş akciğer hasarı (VILI) modelinin oluşturulması (1-12 ay)1.3. Kan gazı analizi (1-12 ay)2. Akciğer dokusunda yapılacak deneyler 2.1. Doku izolasyonu (1-12 ay)2.2. Yaş/kuru ağırlık ölçümü (1-12 ay)2.3 Histopatolojik analizler (12-24 ay)3. Bronkoalveoler lavaj sıvısında (BALF) yapılan analizler3.1. Hyaluronidaz aktivitesinin inhibisyonunun ölçümü (1-12 ay)3.2. Myeloperoksidaz Enzim Aktivitesi Ölçümü (1-12 ay)3.3. Kitotriozidaz aktivitesi ölçümü (1-12 ay)4. Pulmoner arterde yapılacak deneyler4.1.Doku izolasyonu (1-12 ay)4.2.İzole organ banyosu deneyleri (1-12 ay)5.Akciğer dokusu homojenatlarında yapılacak deneyler5.1.Protein miktar tayini (12-24 ay)5.2.Western blot (12-24 ay)

Detay görüntüle