Bombyx mori orta bağırsak dokusunda açlık koşulunda gerçekleşen otofaji ile metamorfozda gerçekleşen otofajinin karşılaştırılması
Proje no. 20470 · Durum: Kapanmış · 2019
Özet
Otofaji, açlık gibi stres koşullarında hücrenin hayatta kalmasını sağlayan bir mekanizma olmasının yanı sıra, hücre ölümünün gerçekleşmesinde ve düzenlenmesinde de anahtar rol oynamaktadır. İpek böceği, Bombyx mori orta bağırsağının larval dönemde oldukça işlevsel iken, larval-pupal metamorfoz sürecinde otofajinin de rol oynadığı programlanmış hücre ölümü yoluyla kısmi dejenerasyona uğradığı gösterilmiştir. Bununla birlikte orta bağırsakta açlık koşullarında otofaji süreci ile metamorfoz sırasında gerçekleşen otofaji arasındaki benzerlik ve farklılıklara ilişkin çalışma bulunmamaktadır. Bu çalışmada; ipek böceği Bombyx mori’ de larval orta bağırsakta metamorfoz sürecinde programlı olarak gerçekleşen otofaji ile aynı dokuda açlık koşulunda uyarılan otofaji arasındaki biyokimyasal ve histolojik farkların veya benzerliklerin ortaya çıkarılması amaçlanmıştır. Bu amaçla 5. instarın 0. ve 4. günü larvalar aç bırakılmıştır. Metamorfozun gerçekleştiği kontrol grubu ile aç bırakılan hayvan gruplarından elde edilen orta bağırsaklarda Bradford yöntemi ile total protein miktarları ölçülmüş; lizozomal enzimlerden olan asit fosfataz, katepsin B ve D aktiviteleri belirlenmiştir. Orta bağırsakların histolojik yapısı Hematoksilen & Eosin boyama yöntemi kullanılarak incelenmiştir. Elde edilen sonuçlar, metamorfoz sürecinde hücreleri ölüme götüren otofajide enzim aktivitelerinin ve protein yıkımının çok daha fazla olduğunu; açlık koşulunda ise, hücrelerin hayatta kalmasını sağlayan otofajide, enzim aktivitelerinin ve protein yıkımının daha düşük düzeylerde gerçekleştiğini göstermiştir.