Protective Effect of Curcumin and Resveratrol on Rotenone-Induced Neuronal Toxicity
Project no. 20049 · Status: Kapanmış · 2018
Summary
Yaygın olarak kullanılan bir pestisit olan rotenon mitokondrilerde kompleks-1 enzimini inhibe ettiği bununla birlikte oksidatif strese neden olduğu bildirilmiştir. Hücre hattında toksisite oluşturmak için de kullanılmaktadır. Bu çalışma, rotenon ile toksisite oluşturulmuş SH-SY5Y hücrelerinde kurkumin ve resveratrol gibi polifenollerin nöroprotektif etkinliğini kıyaslamak ve belirlemek amacıyla yapıldı. Bu amaçla ilk olarak hücre hattında toksisite oluşturan doz belirlendi, etkin doz 200 nM olarak tespit edildi ve deney gruplarında da bu doz kullanıldı. Kurkumin ve resveratrolün 24 saatlik ön uygulanmasından sonra rotenon toksisitesi oluşturuldu ve hücre sağ kalımı değerlendirildi. MTS, tetrazolyum tuzları kullanılarak gerçekleştirilen canlı hücrelerin bu tuzları indirgeyerek renk değişimi sağladığı bir testtir. MTS hücre sağkalımı testi sonuçları, resveratrol ve kurkuminin hücre sağ kalımı üzerinde anlamlı bir etkiye sahip olduğunu göstermektedir. Kullanılan resveratrolün dozu arttıkça koruyucu etkinin yerini toksisiteye bıraktığı gözlendi. Hücrelerin koloni şekillendirme kapasitesini ölçen klonojenik test sonuçları değerlendirildiğinde ise, her iki antioksidanın da tüm dozlarda SH-SY5Y (Nöroblastoma) hücre proliferasyonunu uyardığı görüldü. Çalışmanın son aşamasında ELİSA yöntemiyle apoptozis oluşumu araştırıldı. Hem kurkumin hem de resveratrol apopitoz göstergesi olan aktif kaspaz -3 seviyesini azaltsa da apopitoz oluşumuna karşı koruyuculuğunda kontrol grubuna göre istatistiksel olarak anlamlı bir fark bulunamadı. Sonuçlarımız, rotenonun in vitro ortamda SH-SY5Y hücrelerinin canlılığını azalttığını, antioksidanların (resveratrol ve kurkumin) hücre sağ kalımını ve koloni şekillendirme yeteneğini artırarak koruyucu rol oynadığını gösterdi. Bu etkilerin ortaya çıkmasında kaspaz-3 aracılı apopitoz yolağının etkili olmadığı belirlendi. Anahtar Kelimeler: rotenon; kurkumin; resveratrol; nöronal toksisite; antioksidan