DOPİNG AMAÇLI KULLANILAN ANALİZİNE YÖNELİK YENİLİKÇİ BİYO ANALİZ SİSTEMLERİNİN GELİŞTİRİLMESİ VE LC-QTOF/MS İLE DOĞRULANMASI
Proje no. 1114 · Durum: Kapanmış · 2018
Özet
Proje kapsamında doping maddelerinin yerinde analizine imkan sunabilecek test kitlerinin tasarlanması ve kromatografik metotlarla doğrulama yapılabilmesi için metot optimizasyonu yapılması hedeflenmiştir. Projede uygun yüzey kimyası kullanılarak model olarak seçilen DHEA-S ve testosteron doping maddelerine yönelik, yenilikçi biyosensör metodolojileri için test yüzeyleri oluşturulmuştur ve doping standartlarının teste uygulanması ile çalışma performansları araştırılmıştır. DHEA-S biyosensör sistemi olarak proje kapsamında antikor temelli elektrokimyasal biyosensör sistemi geliştirilmiştir. Bu sistem için altın elektrotlar kullanılmıştır. Elektrot yüzeyleri ilk olarak sisteamin ile kaplanmış ardından çapraz bağlayıcı olarak glutaraldehit kullanımı ile DHEA antikorları yüzeye immobilize edilmiştir. Testosteron dedeksiyonu için ise proje kapsamında antikor temelli elektrokimyasal biyosensör sistemi, yüzey baskılı karbon elektrotlar (SPE) üzerine kurulmuştur. SPE yüzeyi çapraz bağlayıcı olarak glutaraldehit kullanılarak testosteron antikorları ile modifiye edilmiş manyetik nanoparçacıklar ile kaplanmış ve testosteron analitinin yakalanması sağlanmıştır. Her iki sistemin modifikasyon adımları elektrokimyasal teknikler ile görüntülenmiş ve onaylanmıştır. DHEA-S biyosensör sistemi için lineer çalışma aralığı 2,5-100 ng/mL olarak, dedeksiyon limiti (LOD) ise 3,971 ng/mL olarak belirlenmiştir. Testosteron biyosensör sisteminin lineer çalışma aralığı ise 25-1000 ng/mL olarak, LOD değeri 27,00 ng/mL olarak belirlenmiştir. Geliştirilen sensör sistemlerinin seçimliliğinin belirlenmesi için kolesterol, DHEA, bovin serum albümin gibi girişimci moleküller kullanılmıştır. Ayrıca her iki biyosensör sistemi için sentetik serum ve idrar numunelerinde standart katma yöntemi ile denemeler gerçekleştirilmiş ve başarılı sonuçlar elde edilmiştir. Doping maddelerin analizinin gerçekleştirilmesi amacıyla pratik, yenilikçi, uygun maliyetli, portatif olarak tasarlanmış olan biyosensör sistemleri projenin çıktılarını oluşturmaktadır.