Bronkoalveoler Karsinom Hücrelerinde Mezenkimal Kök Hücre ve Saponin Kombinasyonlarının Antiviral Etkisinin Kanatlı Koronavirüs Enfeksiyöz Bronşitis Virüsü (AvCoV-IBV) ile Araştırılması
Proje no. 22577 · Durum: Kapanmış (Yayın bekleniyor) · 2021
Özet
Kanatlı koronavirüs enfeksiyöz bronşitis virüsü (AvCoV-IBV), bir solunum yolu hastalığıdır. Dünya çapında ölümlere yol açtığı için kanatlı endüstrisinde ekonomik kayıplara neden olmaktadır. Dünya genelinde mücadele edilmekte olan şiddetli akut solunum sendromu koronavirüs 2 (SARS-CoV-2) virüsü ile aynı virüs ailesi içinde bulunmaktadır ve genetik yapıları yüksek benzerlik göstermektedir. Bu tez kapsamında SARS-CoV-2 virüsünün sebep olduğu sitokin fırtınası ve solunum problemlerine yönelik in vitro antiviral model sistemi oluşturulması amaçlanmıştır. AvCoV-IBV’nin zoonotik olmaması, daha kolay ve güvenli bir çalışma imkânı sağlaması nedeniyle bu virüsle çalışılmalar yürütülmüştür. Yürütülen tez çalışmasında AvCoV-IBV ile enfekte edilmiş bronkoalveoler karsinom hücreleri (CRL-5807),mezenkimal kök hücre (MKH) ve monositten farklılaştırılmış THP-1 hücreleri ile ko-kültür oluşturulmuştur. Oluşturulan ko-kültür Scoposide A., Scoposide B., Aristatoside B., Balansoide B., Elmalienoside A. saponin molekülleri ile kombinasyonları yapılarak antiviral etkileri doku kültür infektif dozu 50 (DKID 50 ) yöntemi kullanılarak belirlenmiştir. Süpernatantlar toplanılarak ELISA ile antienflamatuvar etkinin belirlenmesi için IL-6, TNF-? ve IL-1ß sitokin miktarlarına bakılmıştır. Çalışma sonuçlarında, MKH-saponin kombinasyonlarının sitokin seviyelerinde azalma gözlemlenmiştir. IL-6 sitokin miktarlarına bakıldığında Aristatoside B. ve Balansoide B. saponin molekülleri ile kombinasyonların daha fazla azalttığı belirlenmiştir (p>0.05). TNF-? sitokin miktarlarında Cephalaria spp. saponin kombinasyonlarının hepsinde ve QS-21 de anlamlı bir düşüş gözlemlenmiştir (p<0.0001). IL-1ß seviyesine bakıldığı zaman saponinlerde yalnızca Scoposide A. ve QS-21 moleküllerinin bulunduğu gruplarda azalma gözlemlenmiştir. Yapılan modelleme sisteminde viral titre için HA ve DKID 50 sonuçları incelenmiştir. Yapılan deneyler sonucunda Aristatoside B., Scoposide A., Scoposide B., Elmalienoside A., Balansoide B. saponinlerinin ve QS-21 molekülü- MKH kombinasyonlarının viral titreyi düşürdüğü belirlenmiştir. Bu sebeple antiviral moleküller olarak kullanılabileceği düşünülmektedir.