Kriyoprotektanların ve PRP ile hazırlanmış vitrifikasyon solüsyonu ile yapılan kriyoprezervasyonun sıçanlarda over dokusu üzerine etkilerinin histokimyasal ve immünohistokimyasal olarak incelenmesi
Proje no. 20518 · Durum: Kapanmış · 2019
Özet
Kadınlarda infertiliteye neden olabilen; kanser tedavilerinde kullanılan radyoterapi ve kemoterapi uygulamaları, immün sistemi baskılamak amacıyla kullanılan bazı ilaçlar ve jinekolojik cerrahi uygulamalar gibi durumlarda doğurganlığın korunması için tedavi seçeneklerine ihtiyaç vardır. Fertiliteyi korumak için oosit, embriyo veya over dokusu dondurularak saklanabilmektedir. Yardımlı üreme merkezlerinde, oosit ve embriyo saklanması rutin olarak uygulanmakla birlikte over doku kriyoprezervasyonu, herkesin kabul ettiği standart bir uygulama yöntemi olmadığından rutin klinik kullanıma geçememiş ve deneysel düzeyde kalmıştır. Yurtiçi ve yurtdışındaki birçok araştırma merkezinde bu konuyla ilgili deneysel çalışmalar devam etmektedir. Araştırma projesine konu olan bu çalışmada her grupta 7 deney hayvanı olacak şekilde 5 çalışma grubu oluşturulmuştur. Grup 1 (n=7): Kontrol grubu, Grup 2 (n=7): PRP içeren Vitrifikasyon solüsyonu ile kriyoprezervasyon işlemi yapıldıktan sonra direkt histolojik takibe alınan grup, Grup 3 (n=7): PRP içeren Vitrifikasyon solüsyonu ile kriyoprezervasyon işlemi yapıldıktan sonra 6 ay süre ile -196?’deki likid nitrojen içerisinde saklanan grup, Grup 4 (n=7): PRP içermeyen Vitrifikasyon solüsyonu ile kriyoprezervasyon işlemi yapıldıktan sonra direkt histolojik takibe alınan grup, Grup 5 (n=7): PRP içermeyen Vitrifikasyon solüsyonu ile kriyoprezervasyon işlemi yapıldıktan sonra 6 ay süre ile - 196?’deki likid nitrojen içerisinde saklanan grup. Vitrifikasyon solüsyonlarının hazırlanmasında kryoprotektan olarak Etilen Glikol (EG) ve DMSO kullanılmıştır. Grup 2 ve Grup 3’te yer alan deney hayvanlarından anestezi altında, ooferektomi işlemi öncesi kardiyak ponksiyon ile 4 ml kan alınarak Santrifüj edilmiş ve elde edilen PRP %10 CaCl ile aktifleştirilerek Grup 2 ve Grup 3’te uygulanan vitrifikasyon solüsyonunun hazırlanmasında kullanılmıştır. Bu çalışma; kriyoprezervasyonda kullanılan kriyoprotektanların ve PRP içeren vitrifikasyon solüsyonlarının, over dokusu kryoprezervasyonunda akut ve uzun dönemdeki etkilerinin histokimyasal ve immünohistokimyasal boyamalar yapılarak mikroskobik olarak incelenmesi, uygulanacak kryoprezervasyon yönteminin ve kullanılacak solüsyonların standartizasyonunun sağlanmasına katkı sunmak adına yapılmıştır. Anahtar Kelimeler: Kriyoprotektan, EG, DMSO, PRP, Vitrifikasyon, Over Kryoprezervasyonu