İyon Serbestleyebilen Biyoaktif Dental Materyallerin Sitotoksisiteleri ve Remineralizasyon Kabiliyetlerinin Araştırılması
Proje no. 28474 · Durum: Kapanmış (Yayın bekleniyor) · 2023
Özet
<p>Kavitasyonlu diş çürüklerinin tedavisinde kullanılan restoratif materyallerin ağızda yenileme ihtiyacı olmaksızın uzun süre idamesi, hem hasta sağlığı hem hekim ve çalışan personelin iş gücü hem de ülke ekonomisine katkısı sebepleriyle istenen ve üzerinde çalışılan bir konudur ki restoratif materyal seçimini direkt etkiler. Güncel diş hekimliğinde iyon serbestlemesi, diş dokularında remineralizasyon oluşturması, biyofilm tabakasında modifikasyonlara sebep olması ve biyofilmin adezyonuna etki etmesi gerekçeleri ile biyoaktif restoratif materyallere olan ilgi de her geçen gün artmaktadır. Bununla birlikte iyon serbestleyebilen biyoaktif materyallerin bu serbestleme sonrasında mekanik özelliklerinin bozulmaması ve materyalin daimî restorasyon materyali olarak uzun süreli kullanımının etkilenmemesi beklenir. Bu bağlamda sürekli yeni malzemeler piyasaya sürülmekte ve üzerindeki çalışmaların sayısı artmaktadır. Sunulan araştırma önerisinin amacı biyoaktif oldukları iddia edilen bir alkasit (Cention N) ve self adeziv hibrit kompozitin (Surefil One) sitotoksisitesi ve remineralizasyon kabiliyetinin bilinen ilk biyoaktif restoratif materyallerden biri olan konvansiyonel cam iyonomer siman (Equa Forte HT Fil) kontrolünde değerlendirilmesidir.</p><p>Bu çalışmada biyoaktif özellik, ekstrasellüler matris mineralizasyonunun varlığına işaret eden <em>“Alizarin red boyama” </em>ve biyomineralizasyonun enzimatik göstergesi olan ‘’<em>alkalin fosfataz’’</em> testi ile<em> </em>tespit edilecektir. Alkalin fosfataz testi restorasyon materyallerinin insan pulpa kök hücreleri (Human dental pulp stem cells HDPSCs) ile 3, 7, 14 günlük inkübasyon sürelerinden sonra, alizarin red boyama ise aynı tip hücrelerin 14 ve 21 günlük inkübasyonundan sonra gerçekleştirilecektir. Bu aşamada her iki test yönteminin de uygulanmasından önce restorasyon materyallerinin kök hücrelerle indirekt teması, cm2 de 5000 hücre olacak şekilde 24 kuyucuklu petrilerde <em>“Transwell” </em>tekniğinin kullanılmasıyla gerçekleştirilecektir. 24 saatlik inkübasyon süresinin ardından hücreler alkalin fosfataz enzim aktivitesinin tespiti ve alizarin red boyama için ayrı ayrı protokollere maruz bırakılarak analiz edilecektir.</p><p>Materyallerin sitotoksisiteleri ise hücre canlılığı testi ve perfüzyon sistemi dahilinde dentin bariyer testi kullanılarak iki farklı şekilde gerçekleştirilecektir. Hücre canlılığı testi için insan gingival fibroblast hücreleri (HGF-1) 96 kuyucuklu petrilere ekilecektir. 6 mm çapında ve 0,5 mm kalınlığında hazırlanan restorasyon materyalleri hücrelerle direkt temas halinde olacak şekilde 24 saat inkübe edilecektir. Restorasyon materyalleri uzaklaştırıldıktan sonra hücre canlılığı üzerine etkisini değerlendirebilmek amacıyla sıklıkla kullanılan ve kalorimetrik bir test türü olan MTT testi ile spektrofotometrik olarak değerlendirilecektir. Perfüzyon sistemi dahilinde dentin bariyer testi için odontoblast benzeri hücrelerin 3 boyutlu kültürleri (SV40-transfekte edilmiş sığır pulpa kaynaklı), 400 mikrometre kalınlığında hazırlanan dentin disklerinin (n=8) pulpal yüzeyi ile direkt temasta olacak şekilde yerleştirilecektir. Restorasyon materyalleri üretici önerileri dikkate alınarak klinik uygulamayı taklit edecek şekilde dentin diskinin üst yüzeyi ile direkt temasta olacak şekilde yerleştirilecek. Hücre canlılığı testinde olduğu gibi perfüzyon sistemi dahilinde dentin bariyer testinde de hücre canlılığı kalorimetrik bir bir test türü olan MTT testi ile spektrofotometrik olarak değerlendirilecektir. Her iki test yönteminde de sonuçların ortak bir test yöntemi (MTT testi) ile değerlendirilebilmesi bu iki test yöntemindeki sonuçları nicel olarak kıyaslama imkânı verecektir.</p>