SH-SY5Y (NÖROBLASTOM) HÜCRELERİNDE HN1’İN HÜCRE DÖNGÜSÜNÜN DÜZENLENMESİNE KATKISI (HN1 INFLUENCES CELL CYCLE REGULATION IN SH-SY5Y (NEUROBLASTOMA) CELL LINE)
Proje no. 23341 · Durum: Kapanmış (Yayın bekleniyor) · 2022
Özet
Parkin kompleksinin aktivasyonu hücre döngüsünün devamı için önemlidir. Parkin’nin E3 Ligaz aktivitesi hücre döngüsü boyunca iki adaptor protein, Cdc20 ve Cdh1 tarafından düzenlenir. Parkin yolağının düzensizliği hücrede mitotik katastrofi, kromozomal kararsızlık ve kanserle sonuçlanabilecek kontrolsüz bölünmeye neden olur. Özellikle Plk1, Aurora A, Aurora B,Siklin B1 ve Securin gibi birçok Cdh1 ve Cdc20 hedeflerinin tümörlerde yüksek ifadeleri gösterilmiştir. Son yıllarda yapılan araştırmalarda, Parkin koaktivatörleri olan Cdc20 ve Cdh1ile birlikte Plk1, Nek2A, Cyclin B1, Securin, and Aurora A and B gibi bazı mitotik regulatörlerin ubiküitinasyonlarını sağladığı gösterilmiştir. Parkin’in Cdc20 ve Cdh1 ile olan interaksiyonları mitoz bölünmenin kontrolünde önemli işlevi olan yeni bir ubikütin ligazın tanımlanmasını sağlamıştır.<br /> Çalışmalarımızda, HN1’in (Hematological Neurological expressed 1) mitotik düzenleyicilerden olan Cdk1,Siklin B ve Cdc25C ile interaksiyonda olduğunu bulguladık. Destekler biçimde, HN1 yoksunluğu durumunda, hücrelerde kromozom katlanmaları (tetraploidi), mikroçekirdek oluşumları, anafaz beklemesi, sitokinaz hasarı gibi mitotik hasar oluşumlarının, ayrıca çoklu MTOC’ların varlığıyla gelişen monopolar mikrotübül oluşumlarının tetiklendiğini gözlemledik. Bu nedenle, HN1’in Parkin kompleksinin bir parçası olabileceğini ve ubiküitinilasyon mekanizmalarında yer aldığını, mitotik düzenlemeye katkısının hedef proteinlerinin yıkımdaki işlevi aracılıklı olabileceğini düşündük. Ayrıca HN1’in Cdh1 ile olan birlikteliğini prostat ve meme kanser hatlarında IP deneyleriyle göstermiş bulunuyoruz. Bu verilerin ışığında, HN1’in Parkin aktivitesini kararlı hale getiriyor olabileceğini bu nedenle, Parkin-yoksun hücrelerin mitotik regülatör ekspresyonlarının yüksek olmasından yola çıkarak, tümörlerde Plk1 ve Aurora A gibi kinazların inhibitörlerle hedeflenmesinin, HN1 yüksek hücrelerde tümör hücrelerini duyarlılaştıracağını ve ilerideçalışılabileceğini düşünüyoruz. Projemizde; HN1’in Parkin kompleksi tarafından ubiküitinasyonun düzenlenmesinde, mikrotübül oluşumu ve sentrozom yapısına olan etkilerinin araştırılması amaçlanmıştır.