GANGLİOSITLERİN CAPL-C ESI-MS/MS İLE ANALİZİ İÇİN YÖNTEM GELİŞTİRİLMESİ VE BİYOLOJİK ÖRNEKLERDE UYGULANMASI
Proje no. 448 · Durum: Kapanmış · 2017
Özet
Gangliositler, üzerinde bir veya daha fazla sialik asit (Sia) ve kompleks şekerler taşıyan glikosfingolipitlerdir. Gangliosit molekülleri çeşitli biyolojik sıvılarda (kan ve süt) ve dokularda (sinir, kas, beyin) bulunur. Sıvı Kromatografi- Kütle Spektrometresi (LC-MS) sistemi, oldukça hassas ve seçimli analiz yapabilme özelliği nedeniyle biyolojik örneklerde gangliosit tayin etmek üzere tercih edilmiştir. Önce standart madde ile LC-MS/MS sisteminde gangliositler için yöntem geliştirilmiştir. Sonra süt kullanılarak ekstraksiyon yöntemi tamamlanmıştır. Bunun için kloroform/su/metanol karışımıyla sıvı-sıvı ve sonra katı faz ektraksiyonla (SPE) ön deriştirme yapılmıştır. Geliştirilen yöntem, böcek model organizma olarak kullanılan Bombyx mori, Galleria mellonella ve Tenebrio molitor dokularında uygulanmıştır. Süt ekstraksiyonu sonucu gangliosit tespit edilmiş ancak böceklerde herhangi bir gangliosit molekülü tespit edilememiştir. Bu sonuçlara göre, böcekler için tartışmalı olan bu moleküllerin geleneksel araçlar ve yöntemlerle tespitinin zor olduğu ortaya çıkmıştır. İleri araştırmalar için daha gelişmiş metotların genetik araçların da desteğiyle yapılması gerektiği düşünülmektedir.