İNSÜLİN BENZERİ BÜYÜME FAKTÖRÜ BAĞLAYICI PROTEİNLERİN (IGFBP) REKOMBİNANT ÜRETİMİ VE KARAKTERİZASYONU
Proje no. 1228 · Durum: Kapanmış · 2016
Özet
Diyabet genetik veya beslenme kaynaklı, pankreas salgı bezinin yeterli miktarda insülin hormonu üretmemesi ya da ürettiği insulin hormonunun etkili bir şekilde kullanılamamasıdır. Bunun sonucunda kan glukoz düzeyinde anormal farklanmaların gelişmesi sonucu oluşan ve ömür boyu süren bir hastalıktır. Diyabetin giderek artan bir sağlık sorunu olması nedeniyle şu an hali hazırda bulunan tedavi yöntemlerine alternatif, etkili, kolay kullanımlı terapötik tedavi yöntemleri geliştirilmeye çalışılmaktadır. İnsülin benzeri büyüme faktörlerinin (IGF'lerin) potansiyel terapötik uygulamaları geniştir. IGF ailesinin, diyabet başta olmak üzere, kanser, büyüme geriliği, kas-iskelet sistemi hastalıkları ve nörodejeneratif hastalıkların tedavisinde kullanım alanları mevcuttur. IGF’ler yapısal olarak insüline benzerdirler ve biyolojik sıvıda, insülin benzeri bağlayıcı peptid bağlayıcı protein (IGFBP)’lere bağlanmış halde bulunur. Şu ana kadar karakterize edilmiş altı memeli IGFBP’i bulunur ve IGFBP-1, IGFBP-2, IGFBP-3, IGFBP-4, IGFBP-5, IGFBP-6 olarak adlandırılır. IGFBP’ler, IGF’lere Tip-1 IGF reseptörlerinden daha yüksek afinitede bağlanırlar. Böylece reseptörlerine bağlanmalarını kontrol ederek IGF aktivitelerini düzenlerler. IGFBP’ler, IGF bağımlı ve IGF bağımsız etkileri ile son derece önemli proteinlerdir. Bu çalışmada dolaşımdaki IGFBP’lerin %60’dan fazlası olan ve IGFBP’lerin en önemlisi olarak kabul edilen, IGFBP-3 rekombinant olarak üretiminin optimizasyonu E.coli BL21 ve E.coli Shuffle T7 Ekspres olmak üzere iki farklı E.coli suşunda, pET21a ve pET22b olmak üzere iki farklı pET ekspresyon sisteminde, farklı sıcaklıklarda ve farklı indüksiyon konsantrasyonlarında çalışılmıştır.