ING4 Geninin Aktarılması Amacıyla Gen Taşıyıcı Sistemler Hazırlanması ve Farklı Kanser Hücre Kültürlerinde Etkinliğinin Gösterilmesi
Proje no. 258 · Durum: Kapanmış · 2016
Özet
Projenin amacı; ING4 gen bölgesini taşıyan plazmid DNA için gen taşıyıcı sistemlerin hazırlanması, bu sistemlerinin karakterizasyon çalışmaları yapıldıktan sonra etkinliğinin hücre kültüründe gösterilmesidir. ING4 kanserli hücrelerde büyümeyi inhibe ederek apoptozisi indükleyen bir proteindir. Birçok kanser türünde bu proteini kodlayan gen bölgesinin delesyona uğradığı ya da protein sentezinin azaldığı gözlenmiştir. Bu sebeple ING4 gen transferinin kanserli hücrelerin üremesini ve çoğalmasını azaltabileceği düşünülmektedir. Bu çalışmada DNA taşıyıcı sistem hazırlamak için sıcak mikroemülsiyon yönteminden faydalanarak katı lipit nanopartiküller hazırlanmıştır. Öncelikle farklı yağ ve sürfaktan karışımları su ile titre edilerek üçgen faz diyagramları oluşturulmuş ve S/Y (su/yağ) mikroemülsiyon bölgeleri tanımlanmıştır. Daha sonra bu mikroemülsiyon bölgeleri içinde kalan formülasyonlar için karakterizasyon çalışmaları yaparak, plazmid DNA ile kompleksleştirmek için partikül boyutu ve zeta potansiyel değerleri uygun olan optimum formülasyonlar belirlenmiştir. Seçilen formülasyonlara DNA yüklenerek stabilite çalışmaları yapılmış, kanserli ve sağlıklı hücre kültürlerinde etkinliği gösterilmiştir. Bu şekilde kanserli hücrelerde delesyona uğramış ya da ekspresyonu azalmış ING4 genine yönelik gen tedavisi hedeflenmektedir.